上海远慕生物科技有限公司

    上海远慕生物科技是家专业供应进口/国产ELISA试剂盒的优质供应商，提供人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒说明书，以及酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，金标检测试剂盒，染色试剂盒，生化试剂盒，培养基，抗体，动物血清，标准品，化学试剂，实验耗材，细胞株，其他实验试剂及实验品，ELISA种属涵盖了科研实验所需的动植物，咨询！

    产品中文名：人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒

    产品英文名：Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

    规格：96T/48T

    保存：2-8℃

    货号：YM-S0069

    使用范围：仅供科研检测，不得用于临床。

    服务承诺：工作时间内免费的技术咨询和指导 。我们的销售工程师经过专业培训的，将为您提供满意的产品和真诚的服务。

    特点：

    一、高效、灵敏、特异的抗体；

    二、稳定的重复性和可靠性；

    三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

    四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

    五、节省实验经费。

   人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒说明书 操作注意事项：

    试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

    实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

    不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

    使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

    加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒说明书 原理技术原理：

    （1）抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

    （2）结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

    （3）酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

    （4）受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

    （5）此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

    （6）加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

    在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括：

    （1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

    （2）包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。

    （3）酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

    （4）酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

    检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。

    试剂盒的标准曲线点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。

    试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。

    试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均<9 %。

    试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。

    检测抗体及酶结合物的稀释度合适（均为1:30）， 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性

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