上海远慕生物科技有限公司

    上海远慕生物科技是家专业供应进口/国产ELISA试剂盒的优质供应商，专业提供人血管内皮细胞生长因子受体3（VEGFR-3）ELISA试剂盒免费代测，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，金标检测试剂盒，染色试剂盒，生化试剂盒，培养基，抗体，动物血清，标准品，化学试剂，实验耗材，细胞株，其他实验试剂及实验品，ELISA种属涵盖了科研实验所需的动植物，咨询！

    产品中文名：人血管内皮细胞生长因子受体3（VEGFR-3）ELISA试剂盒

    产品英文名：Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 3,VEGFR-3 ELISA Kit

    货号：YM-S0109

    价格：电询

    运输方式：快递发货

    检测标本：血清，血浆，尿液，胸腹水，脑脊液，细胞培养上清，组织匀浆等

    特异性： 可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。

    检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

    适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床

    人血管内皮细胞生长因子受体3（VEGFR-3）ELISA试剂盒ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。

   人血管内皮细胞生长因子受体3（VEGFR-3）ELISA试剂盒免费代测 检测包括：

    包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

    1）血清：

    室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    2）血浆：

    应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    3）尿液：

    用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

    4）细胞培养上清：

    检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    5）组织标本：

    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

     操作注意事项：

    （1）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

    （2）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

    （3）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

    （4）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    （5）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    （6）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    （7）加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    （8）按照鸡血红蛋白（HB）ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    （9）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

    ELISA试剂盒技术流程：

    双抗体夹心法（检测未知抗原）

    1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

    2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

    3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

    4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

    5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

    6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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