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产品名称:人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒说明书

产品型号:

产品报价:15

产品特点:人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒说明书由上海远慕提供,中文名:人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒,规格:96T/48T,保存:2-8℃,成分:酶标板,试剂,标准品等,样本:血清、血浆、尿液等。Elisa试剂盒特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。 检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。

人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒说明书的详细资料:

    上海远慕为您提供人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒说明书,我司是经销生物科学领域的知名供货商,自公司成立以来,企业规模迅速发展中,生产加工和销售的产品包括各种化学试剂、培养基、各种ELISA试剂盒、标准品等5万余种类。在业内有*好评,咨询!

    产品中文名:人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒

    别名:人血管生成素2(ANG-2)ELISA Kit

    供货商:上海远慕

    规格:96T/48T

    保存:2-8℃

    试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等

    样本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

    预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    Elisa试剂盒特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。

    应用领域:仅供科研使用,不得用于医学诊断

    检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本

 

   人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒说明书

 

    操作步骤:

    1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)。

    2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

    4. 配液:将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用。

    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。

    8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    9. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

    人血管生成素2(ANG-2)ELISA检测试剂盒检测中样品的处理

    1.细胞培养物上清:

    细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。

    2.血清:

    标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

    3.血浆:

    可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

    4.尿液:

    无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。

    5.组织匀浆:

    将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。

             人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒

 

    操作常见问题解析:

    1.加样?

    在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。

    2.边缘效应

    使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应",即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。

 

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