上海远慕生物科技有限公司

    上海远慕为您提供人血管生成素2（ANG-2）ELISA试剂盒说明书，我司是经销生物科学领域的供货商，自公司成立以来，企业规模迅速发展中，生产加工和销售的产品包括各种化学试剂、培养基、各种ELISA试剂盒、标准品等5万余种类。在业内有*好评，咨询！

    产品中文名：人血管生成素2（ANG-2）ELISA试剂盒

    别名：人血管生成素2（ANG-2）ELISA Kit

    供货商：上海远慕

    规格：96T/48T

    保存：2-8℃

    试剂盒成分：酶标板，试剂，标准品等

    样本：血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

    预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    Elisa试剂盒特点：灵敏性高、特异性强、重复性好。

    应用领域：仅供科研使用，不得用于医学诊断

    检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本

    操作步骤：

    1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）。

    2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

    3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

    4. 配液：将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用。

    5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复5次，拍干。

    6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

    7. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟。

    8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    9. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    人血管生成素2（ANG-2）ELISA检测试剂盒检测中样品的处理

    1.细胞培养物上清：

    细胞培养物于室温1000g，离心10分钟后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。

    2.血清：

    标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g，4℃离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

    3.血浆：

    可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃，1000g离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

    4.尿液：

    无菌收集取初尿，离心除去沉淀物，即可用于检测，要长期保存尿样，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。

    5.组织匀浆：

    将组织标本先用PBS洗涤，除去多余血液，匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜，再经过二次反复冻融破膜，5000g，4℃离心5分钟，取上清即可检测。

    操作常见问题解析：

    1.加样？

    在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。

    2.边缘效应

    使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应"，即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应"，并且可提高测定的重复性。

    人血管生成素2（ANG-2）ELISA检测试剂盒相关产品：

    大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）ELISA试剂盒

    大鼠纤溶酶原激活物抑制因子（PAI）ELISA试剂盒

    大鼠血纤蛋白原降解产物（FDP）ELISA试剂盒

    大鼠血栓调节蛋白（TM）ELISA试剂盒

    大鼠血小板衍生生长因子（PDGF）ELISA试剂盒

    大鼠氧化低密度脂蛋白（OxLDL）ELISA试剂盒

    大鼠血小板活化因子（PAF）ELISA试剂盒

    大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNT）ELISA试剂盒

    大鼠Ⅲ型胶原（Col Ⅲ）ELISA试剂盒

    大鼠C反应蛋白（CRP）ELISA试剂盒

    大鼠组织因子（TF）ELISA试剂盒

    大鼠血小板因子4（PF-4/CXCL4）ELISA试剂盒

    大鼠结缔组织生长因子（CTGF）ELISA试剂盒