上海远慕生物科技有限公司

    上海远慕为您专业提供人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1（TRAIL-R1）ELISA检测试剂盒，我司是专业经营生物培养基，进口/国产ELISA试剂盒，抗体，细胞，标准品，对照品的公司，在广大用户的帮助和支持下，经过不懈的努力，已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一，代理许多先进水平的高科技产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。公司的服务和业务网络遍及全国，在同行获得*好评。咨询！

    产品中文名：人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1（TRAIL-R1）ELISA试剂盒

    别名：人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1（TRAIL-R1）ELISA Kit

    供货商：上海远慕

    规格：96T/48T

    检测方法： ELISA酶联免疫法

    试剂盒保存及有效期：2-8℃，避光保存：6个月。

    检测原理：用肺炎支原体抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中肺炎支原体抗体。

    试剂盒成分：酶标板，试剂，标准品等。

    检测标本：血清，血浆，尿液，胸腹水，脑脊液，细胞培养上清，组织匀浆等。

    预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    Elisa试剂盒特点：灵敏性高、特异性强、重复性好。

    实验要点

    上海远慕洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：

    （1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3-4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。

    （2）流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为*，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。

    检测方法：

    1、间接法测抗体

    间接法是检测抗体zui常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：

    （a）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。

    （b）加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。

    （c）加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。

    （d）加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。

    本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

    2、竞争法

    竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下：

    （a）上海远慕将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤。

    （b）待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温后，酶标抗原与固相抗体的结合可达zui充分的量。洗涤。

    （c）加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原zui多，故颜色zui深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。

    人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1（TRAIL-R1）ELISA试剂盒操作注意事项：

    1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

    2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

    3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

    4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    6.使用干净上海远慕的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    7.加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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