产品名称:人血管生长素(ANG)ELISA检测试剂盒
产品型号:
产品报价:985
产品特点:人血管生长素(ANG)ELISA检测试剂盒由上海远慕提供,我司详细为您介绍它的规格,样本,应用领域,使用原理等。中文名:人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒,保存:2-8℃,成分:酶标板,试剂,标准品等。应用领域:仅供科研使用,样本:血清、血浆、尿液、胸腹水等。成分:酶标板,试剂,标准品等。
人血管生长素(ANG)ELISA检测试剂盒的详细资料:
上海远慕为您提供人血管生长素(ANG)ELISA检测试剂盒,我司是经销生物科学领域的供货商,自公司成立以来,企业规模迅速发展中,生产加工和销售的产品包括各种化学试剂、培养基、各种ELISA试剂盒、标准品等5万余种类。在业内有*好评,咨询!
产品中文名:人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒
别名:人血管生长素(ANG)ELISA kit
供货商:上海远慕
规格:96T/48T
保存:2-8℃
经营种类:进口分装和原装、国产。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
样本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
应用领域:仅供科研使用,不得用于医学诊断,使用前仔细阅读本说明书。
产品原理:血管生长素(angiogenin),单链结构的多肽,由人肺中得到的血管生长素由123个氨基酸组成,分子量近14000,35%的氨基酸与胰腺的RNase相似,在兔角膜中,50ng就能促进血管形成。它对于核糖核苷酸酶的某些传统底物,如小麦胚芽RNA,PolyC等都没有活性。然而人胎盘中RNase抑制剂能破坏血管生长素的活性。它不与肝素结合。
特点:
1. 安全、快速、重复性好;
2. 特异性100%,灵敏度超过90%;
3. 探针性能稳定,低温保存一年以上;
4. 荧光信号强,结果判定直观可靠;
5. 操作简单,定位精准,无实验污染。
人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒技术原理:
(1)抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2)结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3)酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4)受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5)此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6)加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
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