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    中文名：人褪黑素（MT）ELISA试剂盒

    别名：人褪黑素（MT）ELISA Kit

    产品规格：96T/48T

    供货商：上海远慕

    使用目的：用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。

    预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。

    用途：科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断

    人ELISA试剂盒实验原理：

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

    包含以下各组分：

    （1）结合物及标本的稀释液；

    （2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

    （3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），ELISA试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；

    （6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

    注意事项：

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

    4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

    5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

    8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

    人褪黑素（MT）ELISA试剂盒操作步骤：

    实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37℃溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

    1、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l，待测样品孔中先加样品稀释液40?l，然后再加待测样品10?l（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

    2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。

    3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

    5、加酶：每孔加入酶标试剂50?l，空白孔除外。

    6、显色：每孔先加入显色剂A50?l，再加入显色剂B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟。

    7、终止：每孔加终止液50ml，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行

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