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产品名称:人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒

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产品特点:上海远慕为您提供人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒,详细为您介绍它的规格,种类,预期应用,检测种属以及原理。别名:人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA Kit,规格:96T/48T,应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量,待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液等。

人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒的详细资料:

    上海远慕为您提供人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒,我司是经销生物科学领域的供货商,自公司成立以来,企业规模迅速发展中,生产加工和销售的产品包括各种化学试剂、培养基、各种ELISA试剂盒、标准品等5万余种类。在业内有*好评,咨询!

    产品名称:人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒

    别名:人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA Kit

    供货商:上海远慕

    产品规格:96T/48T

    经营种类:进口分装和原装、国产。

    预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等

    特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应

    检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

    检测的原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)

 

人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒说明书

 

    ELISA试剂盒包含以下各组分:

    (1)结合物及标本的稀释液;

    (2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;

    (3)酶标记的抗原或抗体(结合物);

    (4)酶的底物;

    (5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),ELISA试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);

    (6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);

 

    人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒标本的处理:

    (1)细胞培养上清液

    根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。

    (2)脑脊液

    根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。

    (3)血浆

    ①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分钟,4℃,分离血浆样品,然后储存在零下80℃直到使用。

    ②用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测,按照说明书方法检测。

 

    人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒操作步骤(具体操作以说明书为准):

    实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

    1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

    为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

    2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

    3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

    4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。

    5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

    6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

    7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

    8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

 

    人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA分析检测试剂盒操作注意事项:

    1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

    2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

    3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

    4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    7.加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

 

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