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产品名称:人血管活性肠肽(VIP)ELISA检测试剂盒说明书

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产品特点:人血管活性肠肽(VIP)ELISA检测试剂盒说明书由上海远慕提供,我司详细为您接好它的规格,检测限,实验操作步骤等。中文名:人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒,规格:96T/48T, 预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。ELISA试剂盒标本的采集与保存:包括血清,血浆,组织细胞等。

人血管活性肠肽(VIP)ELISA检测试剂盒说明书的详细资料:

    上海远慕为您提供人血管活性肠肽(VIP)ELISA检测试剂盒说明书,我司是专业经营生物培养基,进口/国产ELISA试剂盒,抗体,细胞,标准品,对照品的公司,在广大用户的帮助和支持下,经过不懈的努力,已成为国内生命科 学领域产品的主要供应商之一,代理许多先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。公司的服务和业务网络 遍及全国,在同行获得*好评。专业供应,是国内的供应商,咨询!

    中文名:人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒

    别名:人血管活性肠肽(VIP)ELISA Kit

    供货商:上海远慕

    产品规格:96T/48T

    检测限:1.0 nmol/L

    标记物:HRP

    检测方法:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。

    预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

人血管活性肠肽(VIP)ELISA检测试剂盒说明书

    ELISA试剂盒包含以下各组分:

    (1)结合物及标本的稀释液;

    (2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;

    (3)酶标记的抗原或抗体(结合物);

    (4)酶的底物;

    (5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),ELISA试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);

    (6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);

 

    标本的采集与保存:

    1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融

    2.血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    3.组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织不对应体积的 PBS(一般按 1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记彔。推荐在 PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玱璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于 5000×g 离心 5~10 分钟,取上清检测。

    4.细胞培养上清或其他生物标本:

    请 1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 

    自备物品

    1、 酶标仪(建议仪器使用前提前预热)

    2、 微量加液器及吸头,EP管

    3、 蒸馏水或去离子水,滤纸

 

    操作步骤:

    实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37℃溶解;试剂或样品配制时,均需充分混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

    1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l,待测样品孔中先加样品稀释液40?l,然后再加待测样品10?l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。

    3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    5、加酶:每孔加入酶标试剂50?l,空白孔除外。

    6、显色:每孔先加入显色剂A50?l,再加入显色剂B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟。

    7、终止:每孔加终止液50ml,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

    结果判断与分析

    1、 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

    2、 以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的LTB4标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的LTB4含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

 

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