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产品名称:人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒

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产品特点:人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒由上海远慕提供,我司详细为您介绍它的规格,保质期,检测样本,特点等。别名:人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit,规格:96T/48T, 保存条件:2-8℃低温保存,检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA), 特点:高效、灵敏、特异的抗体;稳定的重复性和可靠性;吸附性能好;用途:只适用于科研

人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒的详细资料:

    上海远慕生物为您提供人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒,我司是国内elisa试剂盒优质供应商,代理销售不同elisa试剂盒品牌的进口/国产elisa试剂盒,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,拥有完善的售后服务,高质量的产品。咨询!

    中文名称:人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒

    别名:人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit

    供货商:上海远慕

    产品规格:96T/48T

    保存条件:2-8℃低温保存

    保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。

    检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)

    待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。

    特点:高效、灵敏、特异的抗体;稳定的重复性和可靠性;吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;节省实验经费。

    用途:只适用于科研

 

 

    处理及要求:

    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

    操作方法:

    一、双抗体夹心法

    1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

    2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

    3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

    4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

    5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

    6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

    二、间接法

    1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;

    2.次日洗涤3次;

    3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;

    4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;

    5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;

    6.zui后一遍用DDW洗涤。

    其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

 

    人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA检测试剂盒使用注意事项:

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

 

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