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甘油菌种复苏保存步骤与注意事项
点击次数:72 更新时间:2024-07-09

甘油菌种复苏保存涉及几个关键步骤,‌包括菌种的保存、‌复苏以及再次保存的过程。‌以下是详细的步骤和注意事项:‌

菌种保存:‌

将菌种接种于LB液体培养基,‌并在对数生长期时,‌当培养体系内浑浊可见时,‌进行保存。‌

准备50%浓度的甘油溶液,‌可以通过等体积的蒸馏水和甘油混合得到。‌

在无菌条件下,‌将菌液与50%浓度的甘油按1:1的比例混合,‌使甘油终浓度达到25%。‌

将混合液转移至2ml离心管中,‌并在-20°C冰箱内保存。‌这种条件下,‌菌种的保存有效期为1年。‌若需长期保存,‌建议在-70°C或-80°C下冻存,‌保藏时间一般为2-4年左右12。‌

菌种复苏:‌

在使用前,‌将保存的菌种在30°C水浴中解冻。‌

解冻后,‌将菌液接种到固体培养基上,‌并在适宜条件下培养24-48小时,‌以恢复菌种的活性。‌

再次保存:‌

复苏后的菌种可以在新的液体培养基中继续培养,‌并再次进行甘油保存。‌这一过程确保了菌种的长期保存和可用性。‌

注意事项:‌

确保所有使用的工具和容器都经过适当的灭菌处理,‌以避免污染。‌

在操作过程中保持无菌条件,‌以防止外界微生物的污染。‌

正确的保存和复苏方法对于保持菌种的活性和纯度至关重要。‌

保存的温度对菌种的长期存活有很大影响,‌低温条件有利于延长保存时间。

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