高氏1号培养基制备的操作步骤
点击次数：1124 更新时间：2023-03-30
高氏1号培养基制备的操作步骤
1、称量和溶化 按配方先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉wan全溶化。然后再称取其他各成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4 ．7 H2 O可先配成高浓度的贮备 液，按比例换算后再加入。待所有试剂wan全溶解后，补充水分到所需的总体积。 配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。
2、调pH 用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌，并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之，用1mol/LHCI进行调节。
3、分装和加塞 将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。
4、包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
5、 灭菌 将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。
6、搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷却至500C左右，将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当，使斜面的长度约为管长 1/3。
7、无菌检查 将灭菌培养基放入37℃的培养箱中培养24～28h，以检查灭菌是否彻di。和改良的差别就在于有没有FeSO4· 7H2O 高氏常常配完后变成褐色也是由于Fe2+氧化为Fe3+的关系，所以常常有人用螯合的FeSO4，防止氧化。
