免疫荧光染色的染料需具备的条件
点击次数：362 更新时间：2022-11-01
用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件：
荧光染料应有较高的量子产额和消光系数；
荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收；
发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差；
容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。
1.异硫氰酸荧光素（FITC）：可产生亮绿色荧光。FITC是免疫荧光标记最/常用的荧光探针。
2.德州红：与生物/素偶联的抗体有很强的亲和力，产生红色荧光。
3.藻胆蛋白类：主要包括藻红蛋白（PE）、藻青蛋白（PC）、别藻青蛋白（APC）三类。多发生橙色至红色荧光。
4.能量传递复合染料
免疫荧光用什么封闭比较好？
可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042，
血清封闭：组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性；封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合；也可以用小牛血清、BSA、羊血清等，但不能与一抗来源一致。
