PCR方法操作中的注意事项
点击次数：475 更新时间：2020-09-07
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA-片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
PCR是实验室常用的实验方法，那么在PCR方法操作中，需要注意哪些事项呢？今天小编带您了解一下。
配 胶
1.电子称的使用，要时刻注意保持电子称的精确性，保持清洁，根据不同的浓度的胶称琼脂糖。
2.加 TAE（化学试剂）的量要适当，以免配出来的胶太薄导致胶孔太浅或浓度太低。
3.倒胶前胶托一定要洗干净，并擦干；倒胶时要待胶冷到一定温度摇匀尽量不要产生气泡。若胶液的温度太高要顶在胶托防止胶托变形。
点样电泳
1.loading要点均匀，控制在 1~2ul的量，并做好对应标记。
2.加样时，枪头要上紧，吸样均一准确，排液时吸头不要有残留。
3.点样前-好检查待用胶是否合格；点样时要对准胶孔，尽量点完所有的样。
4.点完样勿忘点 marker并摆正胶位，电泳仪正负极不要插反，电泳槽的盖子要盖紧。
染 色
1.碰到 EB（化学试剂）的手套要及时丢弃。
2.EB液要适时跟换，盘子要清洗。
3.抹布要严格区分，不可交叉使用
凝胶图像分析仪的使用
1.使用前要注意清洁，以免影响胶图的清晰度。
2.照胶时尽量减少开紫外灯的时间。
3.拍照时先关摄像头再关紫外灯，不可颠倒，严格按照照胶的流程进行。
4.照好的胶及时丢弃。
