蛋白提取操作时应注意的细节！！！
点击次数：852 更新时间：2020-07-08
避免蛋白降解：
总体规则：蛋白酶普遍存在，在提取蛋白质的步骤中，早些抑制，经常抑制
分装蛋白溶液，储存于不同的温度和不同的缓冲液中，测蛋白活性，找出适储存条件。
冷藏，并加入稳定剂。这些稳定剂一般都能充分保持蛋白的生物学活性。
将蛋白溶液储于50%（V/V)的甘油或悬于硫酸铵（3.2M）中，避免冻存
冰结晶会造成物理剪切及蛋白变性。
避免酶的反复冻融，如果酶需要冻存，分装成小管后冻存。
蛋白质的储存：
蛋白样品在液氮中速冻，拿出后加入10-20%的甘油，长期储存
整个实验过程中，都要将蛋白样品置于冰上
从母管中吸取不同的蛋白时，都要用新鲜的枪头
不要将未用的溶液倒回母管
戴手套操作，避免蛋白交叉污染，或是蛋白酶的污染
避免剧烈的震荡，避免溶液中混入蛋白变性剂
实验的过程中应避免灰尘进入，灰尘包含60%的肌氨酸
操作过程中：
操作时总是小体积小量的操作，避免污染，并且动作要快
a：此类蛋白酶在活性中心包含丝氨酸和组氨酸。
b：此类蛋白酶在活性中心包含半胱氨酸（巯基，-SH-）。
c：此类蛋白酶在活性中心包含金属离子（如：n2+，Ca2+，Mn2+）。
d：此类蛋白酶在活性中心包含天冬氨酸族。
生物试剂的使用常识：
（1）试剂切忌与手接触（有些试剂有强腐蚀性、等特性）。
（2）要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，才可取用另一种试剂。
（3）试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后请及时将瓶放回原处，以免遗忘，带来不便。
（4）已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内（怕产生原试剂的再次污染）。
