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DNA合成抑制剂的作用原理
点击次数:81 发布时间:2022-06-29

 DNA合成阻断法:选用DNA合成抑制剂,可逆地抑制DNA合成,而不影响其他时期细胞的运转,最终可将细胞群阻断在S期或G1/S交界处。羟基/脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、高浓度AdR(脱氧腺苷)、GdR(脱氧鸟苷)和TdR,均可抑制DNA合成,使细胞同步化。

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其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小,因此常用TdR双阻断法诱导细胞同步化:在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量TdR-(Hela细胞系,2mol/L;CHO细胞系,7.5mol/L),S期细胞被抑制,其他细胞继续运转,最后停在G1/S交界处,弃去TdR,洗涤细胞并加入新鲜培养液,细胞又开始分裂。当释放时间大于Ts时,所有细胞均脱离S期,再次加入过量TdR,细胞继续运转至G1/S交界处,被过量TdR抑制而停止。

该方法的优点是同步化程度高,适用于任何培养体系,可将儿乎所有的细胞同步化。

缺点是产生非均衡生长现象,个别细胞体积增大。

 

 

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