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ECC选择性显色培养基实验原理
点击次数:601 更新时间:2020-09-21

原理

HiCrome ECC显色培养基使用了HiVeg特别蛋白胨替代动物源特别蛋白胨,使得培养基无BSE/TSE风险。该培养基为鉴别培养基,用于初步鉴定来自食品和环境样品的大肠杆菌和其他大肠菌群(3)。

培养基含两种显色原。一种被大肠埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解,产生蓝色至紫色菌落,另一种被大肠菌群的半乳糖苷酶裂解,产生玫瑰红-粉色菌落(1,2)。HiVeg特别蛋白胨和酵母粉提供氮源物质、维生素B和其他必要生长营养素。乳糖提供可发酵的碳水化合物,中性红为pH指示剂。磷酸氢二钠和磷酸/二氢钾为培养基的缓冲液。氯化钠有助于维持渗透压平衡。

使用前使培养基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(货号MV028)进行1:5或1:10稀释食品样品并进行样品匀浆。将匀浆液0.5ml或1ml用无菌玻璃涂布棒涂布在琼脂表面并在35-37°C孵育18-24小时。孵育结束后对蓝/紫菌落进行计数,并乘以稀释因子。大肠埃希菌的数目以每g食品为单位报告。

培养基组成

成分

克/升

HiVeg特殊蛋白胨

5.00

酵母粉

3.30

乳糖

2.50

磷酸氢二钠

3.50

磷酸/二氢钾

1.50

氯化钠

5.00

显色混合剂

20.30

中性红

0.03

琼脂

15.00

终 pH (25°C) 6.8±0.2

配制

55.83克溶于1000 ml蒸馏水。轻轻加热使培养基*溶解。15磅(121℃)高压灭菌15分钟。冷却至50℃。混匀并倾注无菌平皿。培养基可能不透明,不过不影响其性能。

质量控制

粉末外观:淡粉色均一自由流动粉末。

成胶性:结实,相当于1.5%琼脂糖凝胶。

制备好的培养基的颜色和透明度:平皿内为粉红色不透明凝胶。

配比后的pH值:5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后,pH值自动为6.8 ± 0.2(25°C)。

培养反应

35-37°C培养18-24小时后,观察培养反应

有机体

生长

菌落颜色

大肠杆菌(ATCC 25922)

旺盛

蓝/紫

肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)

旺盛

玫瑰红/粉红

铜绿假单胞菌(ATCC 27853)

好-旺盛

稻草色

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