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人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA试剂盒检测说明书
点击次数:736 更新时间:2018-07-05

  上海远慕生物科技详细为您介绍人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA试剂盒检测说明书,用途,规格,保质期,价格,品牌等详情,本司提供ELISA试剂盒免费代测服务,一周内出结果。

 

  【信息说明

  中文名:人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA试剂盒

  中文别称:人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA Kit

  英文名称:Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA kit

  供应商:上海远慕

  规格96T/48T

  存储条件:2-8℃

  有效期:6个月

  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

  样品形式:血清 / 血浆 / 细胞培养上清 / 其它生物液体。

  预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

 

  【保存方法

  1、血清

  操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

  2、血浆

  EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

  3、细胞上清液

  1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

  4、组织匀浆

  将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液

  5、保存

  如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。

  注意:如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

  【操作步骤

  1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。

  2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

  3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

  4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

  5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

  6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。

  7、温育:重复4的操作。

  8、洗板:重复5的操作。

  9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。

  10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。

  11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。

  12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

 

  【注意事项

  1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6、底物请避光保存。

  7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

  8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9、本试剂不同批号组分不得混用。

  10、如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

 

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