人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒组织结构,操作步骤及信息说明等咨讯由上海远慕生物提供,本司供应销售进口/国产ELISA检测试剂盒,供免费代测服务,一周内出结果,种属包含大鼠ELISA试剂盒,小鼠elisa试剂盒,人ELISA试剂盒,马ELISA试剂盒,鸭ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,犬ELISA试剂盒,植物ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,骆驼ELISA试剂盒及其他动物试剂盒,了解更多种属洽谈!
人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒组织结构
【信息说明】
中文名:人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒
别名:人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA Kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
常见ELISA试剂盒:白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。
适用范围:仅用于科研实验,禁用于临床。
【组织结构】
1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应 在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
【使用原理】
1、ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2、结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
3、在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
4、用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
5、此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
6、由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
【安全性】
1、避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2、实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3、不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
5、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
8、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
9、洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
10、底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
【操作步骤】
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟。
7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。