人四氢生物蝶呤(BH4)ELISA试剂盒技术原理及其他咨讯由上海远慕生物提供讲述，本司的ELISA试剂盒有进口品牌及国产品牌供您选择，种属包含：大鼠，小鼠，人，猴，鸡，鸭，鱼，兔，狗，猪，植物，羊，豚鼠，骆驼及其他种属等，品种齐全，价格实惠，欢迎订购!
【信息说明】
中文名：人四氢生物蝶呤(BH4)ELISA试剂盒
别名：人四氢生物蝶呤(BH4)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6个月
样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
【技术原理】
1、抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2、结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
3、酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
4、受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
5、此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
6、加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平)，并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
【操作步骤】
1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
6、显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟。
7、终止：每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
【注意事项】
1、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
2、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
3、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8、按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
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