改良番红O-固绿软骨染色液的相关咨讯由上海远慕生物提供详细讲述,本司的染色液包含:甘油-孔雀绿染色液,弹力纤维染色液(改良Gomori醛品红法),甘油-亚甲蓝染色液,更多染色液产品请订购!
【信息说明】
产品名称:改良番红O-固绿软骨染色液
供应商:远慕生化试剂厂家
规格:5×50ml/5×100ml
分类:骨组织染色
储存条件:室温,避光,6个月
用途:软骨染色
注意事项:主要由固绿染色液和番红O染色液组成。染色时,注意分化时间,否则容易导致过染或脱色
【操作步骤】
1、标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、常规脱蜡至水。
3、入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。
4、酸性乙醇分化液分化15s。
5、蒸馏水洗1min。
6、在固绿染色液内浸染5min,蒸馏水洗1min。
7、入SafraninOstain内浸染1-2min,蒸馏水洗1min。
8、用乙酸溶液洗涤切片1-2min,以便去除残留的固绿,蒸馏水洗1min。
9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
10、二甲苯透明,光学树脂封固。
【注意事项】
1、需要显示细胞核时,尽量采用铁苏木素染色,其着色力强色调浓,一般的苏木素着色力不强。
2、Weigert苏木素染液不可预先配制后放置,配制好后一般24h失去染色能力。
3、切片在SafraninOstain中染色不宜过长,否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4、切片分化时间应恰当,以背景呈绿色为宜。
5、SafraninOstain染色后,不宜在低浓度乙醇脱水,否则易褪色。
6、95%乙醇脱水时间不宜过长。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
【染色原理】
改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。
番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合,不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。
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