组织线粒体分离试剂盒相关咨讯由上海远慕【进口 国产】标准品对照品厂家提供详细讲述，本司现货供应不同类别的试剂盒，动物血清，培养基，抗体，抗原，实验耗材，染色液，溶液，缓冲液，标准品，对照品，化学试剂，生化试剂及其他试剂等，品种齐全，价格实惠，欢迎订购!
【信息说明】
产品名称：组织线粒体分离试剂盒
供应商：远慕标准品对照品厂家
规格：50T
分类：细胞组分分离
储存条件：-20℃,12个月
用途：快速分离动物硬组织(如骨骼肌)中的线粒体的试剂盒
注意事项：快速便捷分离动物硬组织(如骨骼肌)中的线粒体的试剂盒,分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白,可用于分析细胞色素C等线粒体蛋白向胞浆的释放,大部分获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜,并具有线粒体的生理功能(如检测线粒体膜电位),获得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。
【简介说明】
组织线粒体分离试剂盒(Tissue Mitochondria Isolation Kit)是快速便捷分离动物组织中的线粒体的试剂盒，分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白，可用于分析细胞色素C等线粒体蛋白向胞浆的释放，大部分获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能(如检测线粒体膜电位)，获得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。
该试剂盒可用于从动物软组织(如脑、肝脏)和硬组织(心肌、骨骼肌)中提取线粒体，对于采用该试剂盒提取硬组织线粒体效果不佳者，建议采用Leagene硬组织线粒体分离试剂盒。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
【操作步骤】
1、清洗：取新鲜组织(不宜采用冻存的组织)，迅速称重50～100mg，用预冷的PBS清洗1次，冰上剪成3mm2大小的组织碎片。
2、匀浆裂解：加入预冷的Mitochondria Lysis buffer(如需获得细胞浆蛋白，应提前加入PMSF，至PMSF浓度为1×)，置于冰浴上Dounce匀浆器中匀浆。 不同组织或不同匀浆器所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。
3、离心以去除细胞核、未破碎的细胞和大的膜碎片。
4、上清液转移至一干净离心管离心。
5、弃上清，沉淀为线粒体，如果希望获得去除线粒体的细胞浆蛋白，应在本步骤中收集上清，并且在收集上清时注意勿触及沉淀。
6、保存：弃上清，用适当缓冲液悬浮沉淀。如果用于线粒体酶活性或功能的分析，线粒体沉淀应重悬于Mitochondria Stock buffer;如果用于线粒体蛋白的分析，获得的细胞浆蛋白应保存于1×Protein Stock buffer，即按细胞浆蛋白：Protein Stock buffer (5×)=1:4比例混合;如果用于双向电泳，应使用恰当的保存液。
【注意事项】
1、试剂 (如PMSF)对于不同实验不必全部使用，在实验条件成熟后可以不必使用。
2、如果不是用于制备线粒体蛋白，Mitochondria Lysis buffer不必加入PMSF。如果用于制备线粒体蛋白样品，Mitochondria Lysis buffer需添加PMSF。
3、分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷，全部操作时间尽量控制在1h以内。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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