【 总RNA提取试剂(Trizol )】特点_简介说明_操作步骤等咨讯由上海远慕生物提供讲述，本司是家专业从事科研试剂的老牌商家，所供应的试剂品种齐全，价格便宜，包含ELISA试剂盒，动物血清，标准品，对照品，培养基，抗原，抗体，多肽，酶类，染色液，溶液，缓冲液，实验耗材，生化试剂，化学试剂及其他系列，有进口及国产品牌之分，欢迎订购!
【特点】
RNA完整性好。
纯度高，回收率高。
方便快捷，全过程仅需30 min左右。
【简介说明】
本试剂是一种通用的总RNA提取试剂，适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提，可有效防止RNA在提取过程中的降解。获得的RNA可直接用于Northern杂交，纯化mRNA，体外翻译，RNase保护实验，RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。该试剂可用于100次总RNA提取(10平方厘米细胞或100mg组织)。
【操作步骤】
1、样品处理：
a、植物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b、动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c、贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml裂解液。用取样器吹打混匀。
d、细胞悬液：离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e、血液处理：取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10000rpm离心1分钟。弃上清，若沉淀含有红细胞，可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1ml裂解液混匀。
2、将处理后的样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白复合物*分离。
3、向匀浆样品中加0.2mllv仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置3-5分钟。
4、2-8℃12000rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中，把水相转移到新管中，不要吸到沉淀。
5、吸附柱前处理：在吸附柱中加入500ul洗柱液，室温放置2分钟，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
6、第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀，加入吸附柱静置2分钟，2-8℃12000rpm离心2min，弃废液。
7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
8、向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
9、12000rpm离心2min，弃掉收集管，将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10、将吸附柱放入新管中，向膜中央滴加50-100ulRNasefreeddH2O，室温放置5min，12000rpm室温离心2min即得到RNA。
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