【胰蛋白酶1：250】用途_溶解方法_化学性质_使用说明_注意事项咨讯由上海远慕生物详细为您提供讲述：
【用途】
1、对电点pI 10.5。Ca2+对酶活性有稳定作用。
2、重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。
3、可用于制备单细胞悬浮液或贴壁细胞的消化、分离。
4、胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种，在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌，受肠激酶，或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。胰蛋白酶不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性zui强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为*的工具。
5、胰蛋白酶为蛋白质水解酶，能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，能消化溶解变性蛋质，对未变性的蛋白质无作用，因此，能使脓、痰液、血凝块等分解、变稀，易于引流排除，加速创面净化，促进肉芽组织新生，此外还有抗炎症作用。临床上用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、瘘管等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等。喷雾吸入，用于呼吸道疾病。也可用于治疗毒蛇咬伤。还常用于动物细胞培养前对组织的处理。
【溶解方法】
方法一、用90ML无Ca、Mg离子PBS溶解胰蛋白酶，再加该PBS至100ML(该酶溶解较难，必要时在4度过夜以便溶解)。用时调PH7.2左右，用5.6%NaCO3调试。
方法二、维持反应锅内溶液80℃的温度至少半小时，然后由夹层通入自来水降低锅内溶液温度至 50 ℃，按 1∶30的酶/底物比加入需要量的胰蛋白酶，在搅拌器连续搅拌下开始酶解反应，期间调整通入反应锅夹层的蒸汽量使温度维持在50℃。酶解反应过程中，为保证胰蛋白酶的zui大生物活性使反应液的pH维持在8.0，这就需要不断在反应液中加入NaOH稀溶液。自加入胰蛋白酶起6h后酶解反应结束。
方法三：准确称取NaCl 8.00g，KCl 0.40g、Na2HPO4·7H2O 0.09g、KH2PO4 0.06g、酚红0.01g、NaHCO3 0.35g，溶解于约800mL五蒸水中，充分溶解后定容至1000mL，分装，灭菌备用，制成D-hanks液。准确称取胰蛋白酶0.125g，溶解于100mL D-hanks液中，于4℃过夜，过滤分装，-20℃保存备用。
【胰蛋白酶1：250】详细说明
【化学性质】
性状：由猪胰提取而得的一种肽链内切酶，淡黄色粉末。
溶解性：不溶于乙醇、甘油、lv仿和yi醚。
特性：糜蛋白酶(U/mg)≤75
水分(%) ≤5.0 胰岛素(U/mg) >250
R：36/37/38-42/43 S：36/37/39
保存条件：2-8℃
【使用说明】
本胰蛋白酶可用于制备单细胞悬浮液，胰蛋白酶在用于细胞培养时，可用PBS溶解成浓度为0.25%，也可以加入0.02%EDTA ，过滤除菌后使用，溶液为-20℃保存。
【注意事项】
1. 所有用品均需要高温高压，以灭活残余的DNA酶。
2. 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
3. 用大口滴管或吸头操作，以尽量减少打断DNA的可能性。
4. 用上述方法提取的DNA纯度可以满足一般实验(如Southern 杂交、PCR等)目的。如要求更高，可参考有关资料进行DNA纯化。
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